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17羥孕酮Elisa試劑盒競爭法的實驗原理

點擊次數(shù):1477 更新時間:2017-06-15

17羥孕酮Elisa試劑盒競爭法一般分為直接競爭法和間接競爭法,這里我們以直接競爭法為例進行原理講解。直接競爭法,其基本原理是:將合適濃度的包被抗體包被于微孔板中,加入無關蛋白載體封閉未結(jié)合位點,加入標準品(樣本)和標記的抗原物質(zhì)進行競爭結(jié)合,經(jīng)合適的溫度和一定時間的孵育,洗滌后,加入HRP標記的鏈霉親和素進行反應,TMB顯色,微孔板中顏色的深淺與待測物的濃度呈負相關。
該方法一般用來檢測具有較少表位的小分子物質(zhì),當然,這種方法也可以用來檢測大分子抗原物質(zhì)甚至是抗體。檢測大分子抗原物質(zhì)時,由于空間位阻的影響,使得該檢測方法沒有雙抗體夾心法檢測大分子抗原物質(zhì)靈敏度高。這種方法在檢測抗體時,可能由于兩種競爭的抗體來源不一,導致兩種抗體趨同性不高,17羥孕酮Elisa試劑盒就使得檢測結(jié)果的可靠性不高。
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