Elisa試劑盒根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
近些年來,Elisa試劑盒方法發(fā)展很快,Elisa試劑盒有著高特異性、靈敏性等優(yōu)點(diǎn),接觸ELISA實(shí)驗(yàn)的科研檢測(cè)員也越來越多,那么ELISA新手操作實(shí)驗(yàn)之前需要做哪些準(zhǔn)備?
①Elisa試劑盒標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備 份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存。
②備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。
③根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量。
④Elisa試劑盒按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。
⑤ 選擇抗體時(shí)的選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不 同表位的抗體;*從同一家公司選擇抗體對(duì)。
⑥ Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中為了確定*佳信號(hào)和*背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體 (0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的 系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
⑦Elisa試劑盒一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng) 可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
⑧若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑 制過氧化物酶的活性。
⑨標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì) 胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié) ,將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
Elisa試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、簡(jiǎn)便快捷:450nm酶標(biāo)儀檢測(cè),包含Elisa所需全部試劑和詳細(xì)操作說明,全部現(xiàn)貨。
2、品質(zhì):原料精選,經(jīng)嚴(yán)格甄選,保障各批次批間穩(wěn)定性和可重復(fù)性。
3、認(rèn)可:已有超過380篇SCI文獻(xiàn)引用,兩次登上*期刊Nature。
4、品種齊全:提供近200種常用試劑盒,能檢測(cè)人、大鼠、小鼠、猴和牛等多種屬。
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