綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
?
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
指甲絨黑粉類(lèi)酵母 | Filobasidi | EY-J963787 |
資源名稱: 指甲絨黑粉類(lèi)酵母
種屬: Filobasidium uniguttulatum
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: YM瓊脂:酵母膏 3.0g,麥芽提取物 3.0g,葡萄糖 10.0g,蛋白胨 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾水 1.0L,pH 6.2±0.2。121℃,15min滅菌。
生長(zhǎng)條件: 28℃,2d,好氧
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
2-氨基噻唑別名: 2-氨基噻唑英文名稱: 2-AminothiazoleCAS: 96-50-4分子式: C3H4N2S
硝別名: 咪唑;1-[2-[(4-)甲氧基]-2-(2,4-二-1H-咪唑英文名稱: Econazole nitraCAS: 24169-02-6分子式: C18H15Cl3N2O·HNO3
碳鉀,無(wú)水CAS: 584-08-7單位: 瓶其它:莫諾宗英文名稱: 4-BenzyloxyphenolCAS: 103-16-2分子式: C13H12O2分子量: 200.23
氨甲基膦別名: 氨甲基膦;氨甲基磷;(氨基甲基)膦;(氨基甲基)膦,99%;氨甲基膦(99%);1-Amino-MethylphosphonicAcid;(Aminomethyl)PhosphonicAcid;Ampa;H-Amepo-(OH)2;H-Glyp-(OH)2;Phosphaglycine;(Aminomethyl)Phosphonic;AminomethylPhosphonicAc英文名稱: (Aminomethyl)Phosphonic AcidCAS: 1066-51-9分子式: CH6NO3P
氨地平別名: 阿莫洛地平;絡(luò)活喜;阿洛地平;6-甲基-2-(2-氨基乙氧基)甲基-4-(2-)-1,4-二氫-3,5-吡二甲甲乙酯;安地平;氨地平英文名稱: AmlodipineCAS: 88150-42-9分子式: C20H25ClN2O5
乙酰乙酰鄰羧基水合物別名: 乙酰乙酰鄰羧基;乙酰乙酰-2-羧基;鄰甲基乙酰乙酰;鄰羧基乙酰乙酰;乙酰乙酰鄰羧基水合物;ACETOACET-O-CARBOXYANILIDE;acetoacet-2-carboxyanilide;N-(Acetoacetyl)anthranilicacid;o-Carboxylacetoacetanilide;2-(Acetoacetamido)-benzoicacid英文名稱: N-(Acetoacetyl)anthranilic acidCAS: 35354-86-0分子式: C11H11NO4
4-氨基-1-丁醇別名: 4-氨基-1-丁醇;4-氨基丁醇-1英文名稱: 4-Amino-1-butanolCAS: 13325-10-5分子式: C4H11NO
指甲絨黑粉類(lèi)酵母BMP-7/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7抗體IgG白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體1,2-環(huán)氧十二烷Mouse SSTR1 (Somatostatin Receptor 1) ELISA Kit
BMP8/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體IgG活化誘導(dǎo)胞嘧核苷脫氨酶抗體1,2-環(huán)氧十二烷Mouse SST (Somatostatin) ELISA Kit
BMPR-1A/FITC 熒光素標(biāo)記骨成型蛋白受體1A抗體IgG三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體4-乙酰氧基-2-氮雜環(huán)丁Mouse SPOP (Speckle Type POZ Protein) ELISA Kit
BNP/FITC 熒光素標(biāo)記腦鈉素抗體IgGADP核糖基化因子3抗體1,2-環(huán)氧環(huán)戊烷Mouse SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit
BNP/FITC 熒光素標(biāo)記腦鈉素抗體IgG含氨酰tRNA合成酶結(jié)構(gòu)域1抗體1,2-環(huán)氧環(huán)戊烷Mouse SCCA2 (Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit
BRN3A /FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體IgG粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體3,4-環(huán)氧四Mouse SCFR (Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit
BOb-1/FITC 熒光素標(biāo)記B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG卡爾曼綜合癥基因1抗體3,4-環(huán)氧四Mouse SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit
BRAF/FITC 熒光素標(biāo)記黑素瘤相關(guān)蛋白抗體IgG含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族7抗體基溴硅烷Mouse SREBP (Sterol Regulatory Element Binding Protein) ELISA Kit