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資源名稱: pBARGPE1

種屬: pBARGPE1 plasmid

提供形式: 質(zhì)粒干粉

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 質(zhì)粒載體

培養(yǎng)基: 原核抗性：Amp； 克隆菌株：DH5α； 培養(yǎng)條件：37℃。LB培養(yǎng)基，含50μg/mL氨芐鈉。

存儲(chǔ)條件: 4℃避光保存；運(yùn)輸條件：常溫運(yùn)輸。
規(guī)格參數(shù)：

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低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備　
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備　
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備　
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
Enhydrobacr│aerosaccus 中文名稱：氣囊棲菌Enhydrobacr│aerosaccus分離基物:正常黃桃罐頭提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：1mol/L THF溶液

Sphingomonas│sp. 中文名稱：鞘氨醇單胞菌屬Sphingomonas│sp.分離基物:諾尼已成熟透果內(nèi)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0904生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

rribacillus│sp. 中文名稱：土地芽孢桿菌屬rribacillus│sp.分離基物:野生諾尼幼果內(nèi)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：80% 溶液

Pantoea│sp. 中文名稱：泛菌屬Pantoea│sp.分離基物:野生諾尼種子內(nèi)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：99%

Kocuria│sp. 中文名稱：考克氏菌屬Kocuria│sp.分離基物:西沙諾尼成熟果內(nèi)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：99%

Sphingobium│sp. 中文名稱：鞘氨醇菌屬Sphingobium│sp.分離基物:西沙諾尼成熟果內(nèi)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：97%

Gibberella│sp. 中文名稱：赤霉菌屬Gibberella│sp.分離基物:野生諾尼種子內(nèi)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Daldinia sp. 中文名稱：輪層炭菌屬（斜面）Daldinia sp.分離基物:野生諾尼果內(nèi)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：20%馬鈴薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，瓊脂 15g，pH 自然。生長(zhǎng)條件:25-28℃，好氧生長(zhǎng)特性綜合PDA平板，好氧，28℃，不產(chǎn)孢子。存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：97%
pBARGPE1品牌MSRV selective supplement MSRV 選擇添加劑人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞cDNA二硝氧化鋯水合物, PuratronicCK18 peptide  細(xì)胞角蛋白18多肽抗原

MSRV medium( base) modified MSRV改性培養(yǎng)基（基礎(chǔ)）人肺泡上皮細(xì)胞cDNA8-溴-2'-脫氧腺苷CK18(Cytokeratin 18)  細(xì)胞角蛋白18抗原（C端）

MUELLER-HINTON agar MUELLER-HINTON 瓊脂人支氣管上皮細(xì)胞cDNA9,10-二苯基蒽CK14/17/42/10 peptide  細(xì)胞角蛋白14抗原

MUELLER-HINTON agar .to NCCLS MUELLER-HINTON瓊脂人氣管上皮細(xì)胞cDNA9,10-二苯基蒽CK16(Cytokeratin 16)  細(xì)胞角蛋白16抗原

MUELLER-HINTON broth MUELLER-HINTON 肉湯人小氣道上皮細(xì)胞cDNA9,10-二苯基蒽CK17(Cytokeratin 17)  細(xì)胞角蛋白17抗原

Nutrient agar營(yíng)養(yǎng)瓊脂人肺成纖維細(xì)胞cDNA二苯基次膦酰CK19  細(xì)胞角蛋白19多肽抗原

Nutrient broth 營(yíng)養(yǎng)瓊脂人支氣管平滑肌細(xì)胞cDNA二苯基次膦酰CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide  細(xì)胞角蛋白1/8/19抗原

OF basal medium acc.to HUGH and LEIFSON OF基礎(chǔ)肉湯人氣管平滑肌細(xì)胞cDNA5-溴-2-苯甲CK2(casein kinase 2)  細(xì)胞角蛋白2抗原