綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
帚枝霉屬(斜面)說(shuō)明書(shū) | Sarocladiu | EY-J963580 |
資源名稱(chēng): 帚枝霉屬(斜面)
種屬: Sarocladium sp.
提供形式: 凍干粉
安全等級(jí): 1
模式菌株: 未知
培養(yǎng)基: 綜合PDA+乳糖( 1升普通PDA加5g乳糖):馬鈴薯煮汁1000mL,二氫鉀二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 22℃,好氧
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Salmonella│champaign 中文名稱(chēng):香潘沙門(mén)氏菌Salmonella│champaign提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:39 z48 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salmonella│infantis 中文名稱(chēng):嬰兒沙門(mén)氏菌Salmonella│infantis提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:6,7 z49 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Salmonella│wichita 中文名稱(chēng):威奇塔沙門(mén)氏菌Salmonella│wichita提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1,13,23 - z37培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)
Salmonella│mikawasima 中文名稱(chēng):三河島沙門(mén)氏菌Salmonella│mikawasima提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:6,7 y e,n,z15,z50培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)
Citrobacr│sp. 中文名稱(chēng):拘櫞桿菌Citrobacr│sp.提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:48,Vi - 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)
Salmonella│aberdeen 中文名稱(chēng):阿柏丁沙門(mén)氏菌Salmonella│aberdeen提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制備O:11血清 11 i 1,2培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Salmonella│senfnberg 中文名稱(chēng):山夫登堡沙門(mén)氏菌Salmonella│senfnberg提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制備O:19血清 1,3,19 g,s,t -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Salmonella│newport 中文名稱(chēng):紐波特沙門(mén)氏菌Salmonella│newport提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制備H:h血清 6,8 e,h 1,2培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
帚枝霉屬(斜面)說(shuō)明書(shū)LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶抗體侖氨西林3-延胡素氨基酯Human SCCA2 (Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit
LPLUNC1 鼻咽癌癌基因抗體克拉維3-延胡素氨基酯Human pPLA2 (Phospholipase A2, Pancreas) ELISA Kit
LRIG1 LRIG1抗體甲磺四氫吡喃-4-Human DS (Dermatan Sulfate) ELISA Kit
LRIG2 LRIG2抗體鹽左氧沙星四氫吡喃-4-Human MS (Melatonin Sulfate) ELISA Kit
LRIG3 LRIG3抗體7-ACA4--2-三乙Human Trx (Thioredoxin) ELISA Kit
LRP/MVP 肺耐藥相關(guān)蛋白抗體S4'--3'-(基)苯乙Human TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit
LRP1/CD91 低密度脂蛋白相關(guān)受體1抗體B4'--3'-(基)苯乙Human TBP2 (Thioredoxin Binding Protein 2) ELISA Kit
LRP6 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體DAPTHuman IAP (immunosuppressive acidic protein) ELISA Kit