綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
長(zhǎng)雙歧桿菌豬亞種規(guī)格 | Bifidobact | EY-J963982 |
資源名稱(chēng): 長(zhǎng)雙歧桿菌豬亞種
種屬: Bifidobacterium longum subsp. sius
分離基物: pig faeces
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: yes
應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株 of B. suis
培養(yǎng)基: 雙歧桿菌培養(yǎng)基:大豆蛋白胨5.0g,胰胨5.0g,酵母提取物10.0g,葡萄糖10.1g,鹽溶液40.0ml,L-半0.5G, 0.1%刃天青1.0ml, 瓊脂15.0g, 蒸餾水1.0L,pH7.0 鹽溶液:CaCl2 0.2g ,MgSO4·7H2O 0.48g ,K2HPO4 1.0g, KH2PO4 1.0g,NaHCO310.0g,NaCl1.0g,蒸餾水1.0L, pH6.5
生長(zhǎng)條件: 37℃,厭氧
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
紅、林可和泰樂(lè)菌素殘留檢測(cè)試紙條AntiSpindlin 1/SPIN2 0.2ml
克侖特羅、萊克多巴和沙丁殘留檢測(cè)試紙條antiSPY 0.1ml
克侖特羅和萊克多巴殘留檢測(cè)試紙條AntiSRC 0.2ml
泰樂(lè)菌素和殘留檢測(cè)試紙條AntiSRG2 0.2ml
甲砜和尼考?xì)埩魴z測(cè)試紙條AntiSSA/RO 0.1ml
硝基類(lèi)藥物殘留檢測(cè)試紙條AntiSSB/La 0.2ml
羥吡殘留檢測(cè)試紙條AntiSSTR1 0.2ml
Kallikrein 10, KLK 10 Elisa Kit 氫二鈉二水Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Kallikrein 10, KLK 10 Elisa Kit Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Phospholipase Cγ1, PLCγ1 Elisa Kit聚二200Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Phospholipase Cγ1, PLCγ1 Elisa Kit結(jié)晶碳鈉(>99%,BR)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
neuraminidase, NA Elisa Kit中性鋁(BR)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
neuraminidase, NA Elisa KitD酒石(>99%,BC)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
phosphoinositidespecific phospholipase C, PIPLC Elisa Kit吲哚(>98%,BR)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
phosphoinositidespecific phospholipase C, PIPLC Elisa Kit鋰(>98%,BR)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Phospholipase C, PLC Elisa Kit油鈉(>98%,BR )Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Phospholipase C, PLC Elisa Kit四甲基銨(>99%,BR)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
tyrosine kinase2, Tyk2 Elisa Kit1辛烷磺鈉(>98%,BC )Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
tyrosine kinase2, Tyk2 Elisa Kit鈣一水(>98%,BR)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Interleukin 1β converting enzyme, ICE Elisa Kit三鈣(>98%,BR)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Interleukin 1β converting enzyme, ICE Elisa KitDL硒代蛋(USP)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
integrinlinked kinase 1, ILK1 Elisa Kit蜜二糖Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
integrinlinked kinase 1, ILK1 Elisa Kit草鈉(>98%,BC)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
孕激素/孕(PROG)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: PROG ELISA Kit
末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA檢測(cè)試劑盒HumaerminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T
白介素21(IL-21)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 21,IL-21 ELISA Kit
CLIAKitfoFPIELISAKit組織因子途徑抑制物規(guī)格:48T/96T
體CYP1A2RFLP基因分析試劑盒20次
ELISAKitCLA抗膠原蛋白抗體規(guī)格:48T/96T
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔(ADR)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit adramycin,ADR ELISA Kit
Ⅸ(FⅨ)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: FⅨ ELISA Kit
RabbitOsteoprotegerin,OPG酶聯(lián)免疫試劑盒兔骨保護(hù)素(OPG)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanArginase,Arg酶聯(lián)免疫試劑盒精氨酶(Arg)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanComplemefragme3brccptor,C3bRELISAKit補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
長(zhǎng)雙歧桿菌豬亞種規(guī)格M-CSF Receptor/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠巨噬細(xì)胞集落激因子受體抗體IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框183抗體4--2-胺Porcine UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit
Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠肥大細(xì)胞蛋白酶7抗體IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框187抗體鄰苯二甲二庚酯Porcine C1INH (Complement 1 Inhibitor) ELISA Kit
TPSB2/Tryptase Beta2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠肥大細(xì)胞類(lèi)β2IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框189抗體2′,4′-二苯乙Porcine sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit
MCT1/FITC 熒光素標(biāo)記單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框190抗體2′,4′-二苯乙Porcine ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit
MDM2/FITC 熒光素標(biāo)記雙微體2癌基因抗體IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框192抗體鼠尾草Porcine SIGLEC1 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 1) ELISA Kit
Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化雙微體2癌基因抗體IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框194抗體鼠尾草Porcine C1r (Complement Component 1R) ELISA Kit
Mdr-1/FITC 熒光素標(biāo)記多藥耐藥蛋白抗體IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框198抗體氮雜環(huán)丁烷鹽鹽Porcine UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit
Measles virus of fusion protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗麻疹病抗體IgG1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體氮雜環(huán)丁烷鹽鹽Porcine BACE1 (Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit