運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告?
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
三代蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Gyrodactylus salaris | EY00P8988 |
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
羥基纖維素(粘度11250-21000mPas)Smyrindioloside Schizandrin B
羥基纖維素Thonningianin A Schisantherin A
羥基纖維素Tokinolide B Sipeimine
羥基纖維素(30000 mpa.s)Triptonine B Crocin
羥基纖維素(30000 mpa.s)α-倒捻子素(標(biāo)準(zhǔn)品) Crocin I
羥基纖維素(4000mpas)α-蒎烯 Crocin II
羥基纖維素(4000mpas)α-乳香酸 Tenuifolin
麥芽糖;淀粉糖α-石竹烯 Agrimol B
麥芽糖;淀粉糖α-,細(xì)辛(標(biāo)準(zhǔn)品) Sanguinarine
麥芽糖;淀粉糖α-香附酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Vanillic acid
ONX-0914 (PR-957)α-常春藤皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Vanillic acid
ONX-0914 (PR-957)β,β-二甲基烯酰阿卡寧(標(biāo)準(zhǔn)品) Typhaneoside
N-壬?;?N-甲基葡萄糖(MEGA9)β-桉葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside
甲基纖維素(100000mPa.s)β-谷甾 Sclareol
甲基纖維素(4000 mPa.s)β-胡蘿卜素(標(biāo)準(zhǔn)品) Berberine
三代蟲探針法PCR熒光定量試劑盒Toll樣受體8(TLR8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿法替尼雙馬來酸鹽 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用100mL
Toll樣受體10(TLR10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)阿法替尼雙馬來酸鹽 質(zhì)量規(guī)格:3-5mm,球形100mL
花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)胞磷鈉;5-胞苷二磷酸單鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:2-3mm,球形125mL×4
花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)胞磷鈉;5-胞苷二磷酸單鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:20-40目,氣相、液相色譜柱100mL
花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)胞磷鈉;5-胞苷二磷酸單鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱100mL
抑制蛋白β1(ARRβ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)硬脂酸 質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱125mL×4
抑制蛋白β2(ARRβ2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)硬脂酸 質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱100mL
防御素β1(DEFβ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)硬脂酸 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用100mL