產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
封閉毛細線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Capillaria obsignata | EY00P8794 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
3,5-二溴-4-羥基吡啶N,N-二(2-羥乙基)[生物研究用Good's緩沖液中的成分] N,N-Di(2-hydroxyethyl)glycine [Good's buffer component for biological research]>99.0%(T) Diphenyl sulfone
alpha-溴-2-氯N,N-二(2-羥乙基)[生物研究用Good's緩沖液中的成分] N,N-Di(2-hydroxyethyl)glycine [Good's buffer component for biological research]>99.0%(T) Dimethoate
4-氟-3-甲氧基溴芐N,N-二(2-羥乙基)[生物研究用Good's緩沖液中的成分] N,N-Di(2-hydroxyethyl)glycine [Good's buffer component for biological research]>99.0%(T) Dicofol standard solution
4-氯噻吩[2,3-D]嘧啶雙[4-(二甲氨基)苯基] Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane >98.0%(GC&T) Dicofol standard solution
噻吩并[2,3-D]嘧啶-4(3H)-酮雙[4-(二甲氨基)苯基] Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane >98.0%(GC&T) Diniconazole
羥乙磺酸噴他瞇賓雪德拉氏綠隱色堿 Bindschedler's Green Leuco Base >98.0%(LC&T) Diethylene glycol
4-甲硫基乙酯賓雪德拉氏綠隱色堿 Bindschedler's Green Leuco Base >98.0%(LC&T) Diethylene glycol
4-乙酸乙酯4,4'-雙(二甲氨基)二苯酮 4,4'-Bis(dimethylamino)benzophenone 1-Dodecanol
六鈷酸鋅1,5-雙(4-基)碳酰肼 1,5-Bis(4-nitrophenyl)carbohydrazide DIRECT BLUE 6
1,4-雙[2-(4-甲基-5-苯基噁唑基)]苯 [用于閃爍光譜法] 1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene [for scintillation spectrometry]>98.0%(LC&N) Disperse Orange 37
1-(N-Boc-氨乙基)哌1,4-雙[2-(4-甲基-5-苯基噁唑基)]苯 [用于閃爍光譜法] 1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene [for scintillation spectrometry]>98.0%(LC&N) Diethyltin-dichloride
4-脲二乙二二甲 Diethylene Glycol Dimethyl Ether >99.0%(GC) Napropamid
乙二四乙酸銅鈉二水合物二乙二二甲 Diethylene Glycol Dimethyl Ether >99.0%(GC) Diflubenzuron solution
苯基胍碳酸鹽四乙二二甲基 Tetraethylene Glycol Dimethyl Ether >98.0%(GC) Dithianon
5-甲基-2-呋喃四乙二二甲基 Tetraethylene Glycol Dimethyl Ether >98.0%(GC) Dazomet
封閉毛細線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒10kDa熱休克蛋白1(HSP10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鈉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標準品1ml(500X)
肝膠原凝集素1(CLL1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%6次/盒
肌營養(yǎng)不良蛋白(DMD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鈉(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品6次/盒
親環(huán)素A(CYPA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)環(huán)吡司; 環(huán)吡酮 質(zhì)量規(guī)格:含量98%,化學純3×1ml
Endoglin蛋白(ENG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)環(huán)吡司; 環(huán)吡酮 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,生化試劑級1ml(500X)
細胞絨毛蛋白(CVL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)環(huán)吡司; 環(huán)吡酮 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%,標準品6次/盒
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡE肽1(GTF2E1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)環(huán)吡司; 環(huán)吡酮 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%
殺傷細胞凝集素樣受體亞家族C成員2(KLRC2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)環(huán)吡司; 環(huán)吡酮(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:供TCL鑒別用