實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；NCI-H716[H716] | 貼壁生長 | EY-X63940 |
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細(xì)胞名稱 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；NCI-H716[H716]
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 從一位經(jīng)5-氟治療的患者腹水中得到的細(xì)胞建立了這個細(xì)胞株。與其它結(jié)直腸癌細(xì)胞系不同，這株細(xì)胞有多巴脫羧酶，細(xì)胞質(zhì)中有核心致密的內(nèi)分泌型顆粒。這株細(xì)胞不表達(dá)TAG-72或CA19-9抗原，也不生成癌胚抗原（CEA）。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
羽狀斑駁病檢測試劑盒
Reinking3-氨基苯酸Human STXBP4 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；Anti-HBx KY01拉丁屬名: Streptomyces griseoruber5-溴戊酸Human STK24 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；8D8拉丁屬名: Ralstonia pickettii5-溴戊酸Human STK25 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；AC10364拉丁屬名: Bacillus pumilus5-溴戊酸Human STK31(Serine/threonine-protein kinase 31) ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；7G6用途: 固氮。鹽酸苯甲脒，水合物Human STK3 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；3G10拉丁屬名: Bacillus cereus鹽酸苯甲脒，水合物Human STK32A ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；4E3注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用鹽酸苯甲脒，水合物Human STK32C ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；11B10拉丁屬名: Botryosphaeria ribis Grossenb. 尿素-15N2Human STK32B ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；1E4拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum尿素-15N2Human STK33 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；IE1注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用1-甲基-4-哌啶甲Human STK33 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；8G3-B5-SP20用途: 食用1-甲基-4-哌啶甲Human STK32B ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；8D6拉丁屬名: Alternaria sp. 1-甲基-4-哌啶甲Human STK32C ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；CR-M01注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用(R)-(-)-扁桃酸甲酯Human STEAP3 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；W5注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用(R)-(-)-扁桃酸甲酯Human STK36 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；14853-1hz-5/C377拉丁屬名: Grimontia hollisae苯并(k)熒蒽Human STIM1 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株；HE4-2B8注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治
VSIG4-11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣ProtoⅨ
鎂原卟啉檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株；3A2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Mg-protoporphyrin
原脫植基葉綠素檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株；8-F3（IgG1）形態(tài)特性: 上皮樣protochlorophyllide
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；NCI-H716[H716]新芒果苷64809-67-2中文別名：新杧果苷
英文名：Neomangiferin
CAS登錄號：64809-67-2
分子式：C25H28016
分子量：584.14
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：淡黃色粉末
規(guī)格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：漆樹科植物芒果Mangifera indica Linn.果實、葉、樹皮
溶解性：溶于及55％乙醇，微溶于和，不溶于、及等。
熔點：230℃(分解)
藥理藥效：芒果苷具有抗氧化、抗細(xì)菌、抗病、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤等多方面的生理活性和藥理作用。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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