公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小鼠肺成纖維細胞;WML2 | 貼壁生長 | EY-X63752 |
細胞名稱 小鼠肺成纖維細胞;WML2
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性小鼠的肺組織。1985年中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P6
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Tricin 7-O-glucoside
CAS No.:32769-01-0
中文名:苜蓿素-7-O-葡萄糖苷
分子式:C23H24O12
三七皂苷R1 訂購|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格: 20mg
圣草次苷 訂購|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格: 20mg
1羥基2,3,4,7四氧基山山 訂購|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格: 10mg
熊去氧膽 訂購|咨詢 跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L) 規(guī)格: 20mg
新芒果苷 訂購|咨詢 跨膜蛋白5(TMEM5) 規(guī)格: 20mg
鄰氧基桂 訂購|咨詢 蝸管蛋白(COIL) 規(guī)格: 20mg
基蓮心 訂購|咨詢 嗅素1(OLFM1) 規(guī)格: 20mg
葒草苷 訂購|咨詢 嗅素2(OLFM2) 規(guī)格: 20mg
厚樸 訂購|咨詢 嗅素3(OLFM3) 規(guī)格: 20mg
異佛手柑內酯 訂購|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格: 20mg
隱綠原 訂購|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格: 20mg
豆甾(95%) 訂購|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格: 20mg
香葉木素 訂購|咨詢 嗅蛋白(Olfactorin) 規(guī)格: 20mg
華基(97%) 訂購|咨詢 錨定蛋白重復域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格: 20mg
長春瑞濱 訂購|咨詢 錨定蛋白重復域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格: 20mg
蒼術素 訂購|咨詢 錨定蛋白重復域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格: 20mg
白花前胡素 訂購|咨詢 錫蛋白(SNN) 規(guī)格: 20mg
補骨脂二氫黃 訂購|咨詢 催產素(OT) 規(guī)格: 20mg
WAPL EBV核蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate
CAPD3/hCAPD3 濃縮素2復合亞基D3抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml dATP 100 mM solution
AMSH 信號轉導銜接結合蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Sodium decanoate
ASB3 錨蛋白重復序列細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Agarose
EIF2C1/Ago1 真核翻譯起始因子2C1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Agarose
Anillin 胞環(huán)蛋白肌動蛋白結合蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Phytohemagglutinin
BIN3 細胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Kinetin,6Furfurylaminopurine
CCDC11 卷曲螺旋結構域蛋白11抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml EGTA, egtazic acid
紅相關物質N標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
吡嗪酰標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Pyrazinamide
()表沒食子兒茶素沒食子酯標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
煙酰標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Niacinamide (Vitamin B3)
異標準品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:Cumene
曲三硅相關物質B標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
醋標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Betamethasone Acetate
阿散標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Arsanilic Acid
琥珀美爾標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Metoprolol Succinate
非那雄標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Finasteride
小鼠肺成纖維細胞;WML2棉子糖-雙岐桿菌鑒定規(guī)格:20支詳情介紹
牛津瓊脂(OXA)平板(9cm)規(guī)格:10個/包用途:用于單增李氏菌的選擇性分離
無氮培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于自生固氮菌和鉀細菌的培養(yǎng)
輔酶I(NDA)規(guī)格:1g用途:進口
匹克氏肉湯基礎A規(guī)格:100g用途:用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng) ,需添加脫纖維羊血(GB標準)
SIM動力培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于動力試驗
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。