細(xì)胞名稱 恒河猴腎細(xì)胞;RM-1
形態(tài)特性: 上皮樣,多角形
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一獼猴的腎組織。1982年由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院昆明醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P6
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
恒河猴腎細(xì)胞;RM-1 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63734 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
5,6,7,4'-Tetramethoxyflavone
CAS No.:1168-42-9
中文名:5,6,7,4'-四甲氧基黃
分子式:C19H18O6
型肝炎病表面抗體(AntiHBs) 訂購(gòu)|咨詢 (VE) 規(guī)格: 24支/套
芝林素;Sesamolin 訂購(gòu)|咨詢 1(VK1) 規(guī)格: 20mg
異補(bǔ)骨脂二氫黃;Isobavachin 訂購(gòu)|咨詢 巢蛋白(NID) 規(guī)格: 20mg
異;Isosilybin 訂購(gòu)|咨詢 巢蛋白2(NID2) 規(guī)格: 10mg
芫花素;Genkwanin 訂購(gòu)|咨詢 巢蛋白2(NID2) 規(guī)格: 20mg
;Ephedrine hydr 訂購(gòu)|咨詢 琥珀受體1(SUR1) 規(guī)格: 20mg
香葉;Geraniol 訂購(gòu)|咨詢 斑聯(lián)蛋白(ZYX) 規(guī)格: 20mg
辛夷脂素;Fargesin 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體1(CCR1) 規(guī)格: 20mg
五味子酯;Schisantherin 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體1(CCR1) 規(guī)格: 20mg
β蛻皮激素;Hydroxyecdyso 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體2(CCR2) 規(guī)格: 20mg
三尖杉寧;Cephalomannine 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體3(CCR3) 規(guī)格: 20mg
穗花杉雙黃;Amentoflavone 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體4(CCR4) 規(guī)格: 20mg
人參皂苷Rk3;Ginseside 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體5(CCR5) 規(guī)格: 20mg
; 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體6(CCR6) 規(guī)格:
10羥基攀援山橙;10Hydrox 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體7(CCR7) 規(guī)格: 20mg
羥基A;Hydroxysaff 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體7(CCR7) 規(guī)格: 20mg
擬人參皂苷RT5;Pseudoginse 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元受體8(CCR8) 規(guī)格: 20mg
絡(luò)緦;Rosin 訂購(gòu)|咨詢 趨因子CC基元配體1(CCL1) 規(guī)格: 10mg
SPHK2 鞘激酶2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Columbianetin
STK3 絲/蘇蛋白激酶3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Eupatilin
IKIP IKK激酶相互作用蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Rimonabant carboxylic acid
AMACR/P504S α甲基?;缚贵w 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Zeaxanthin
CASC3/MLN51 腫瘤易感候選基因3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Triethylenethiophosphoramide
phosphoIKKi/IKKe(Thr500) 核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Pramipexole Base
TIAF1 TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Pramipexole Base
Cipar1 前列腺雄激素抑制信號(hào)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Genistein
釔 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Yttriumoxide 含量:BR,97%
蟻銨 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Ammoniumformate 含量:CP,93.5%
蟻鉀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Potassiumformate 含量:BR,95%
異基βD代半乳糖吡喃糖苷 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:IPTG 含量:BR,98%
異基鋁 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Aluminumisopropoxide 含量:BR,89%
異福爾 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Isophorone 含量:CP,99%
異檸檬脫氫酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Isocitratedehydrogenase 含量:BR,30u/ul
異 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Sodiumcyanate 含量:CP
異三十 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Squalane 含量:AR,97%
異維生素C 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:DSodiumisoascorbiate 含量:AR,98.5%
恒河猴腎細(xì)胞;RM-1支原體半流培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于支原體的培養(yǎng)
Fraser培養(yǎng)基顆粒規(guī)格:250g用途:用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
輔酶I(NDA)規(guī)格:1g用途:進(jìn)口
沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于真菌的培養(yǎng)
半胱氨稀釋液規(guī)格:250g用途:用途:用于制備樣品時(shí)的稀釋液。
品紅亞硫鈉瓊脂規(guī)格:250g用途:用于飲用水,水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證(GB標(biāo)準(zhǔn))
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63210 |
細(xì)胞名稱 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 表達(dá)SV40大T抗原,可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細(xì)胞;用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染時(shí)可高表達(dá)AP融合蛋白。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:4~8傳代;26~36小時(shí)1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Anti-Apo-E 載脂蛋白E抗體 0.1ml
Anti-APP695/770 淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
Anti-AQP-2 水通道蛋白-2抗體 0.1ml
Anti-AQP-3 水通道蛋白-3抗體 0.1ml
Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗體 0.1ml
Anti-AR 雄激素受體抗體 0.1ml
Anti-ARC ARC抗體 0.2ml
Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6抗體 0.2ml
Anti-Aromatase P450 芳香化酶/細(xì)胞色素P450/P450抗體 0.1ml
anti-ARIP2a 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體 0.1ml
anti-β-arrestin 1/2 β-抑制蛋白1/2抗體 0.1ml
anti-ARIP2B 激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體 0.2ml
Anti-ART 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子GDNF的一種抗體 0.1ml
Anti-ARα1 α1腎上腺素能受體抗體 0.1ml
Anti-ASCL1/MASH1 神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體 0.1ml
anti-ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 0.1ml
anti-ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2 0.1ml
Anti-AT/AGT 血管緊張素原抗體 0.1ml
Anti-AT1R 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 0.2ml
Anti-ATF1 活化復(fù)制因子1抗體 0.1ml
Anti-ATF2 活化復(fù)制因子2抗體 0.2ml
Anti-ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 0.2ml
Anti-B7-H1/PDL1/CD274 程序性死亡配體1抗體 0.1ml
Anti-B7-H4 B7H4抗體 0.2ml
Anti-BACE/ASP2 β分泌酶抗體 0.1ml
Anti-Bad 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體 0.1ml
anti-Bak Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體 0.1ml
Anti-BADH2 BADH2抗體 0.1ml
人(TP-5)elisa試劑盒 Human Thymopentin, TP-5 Elisa Kit 96T/48T
人(Thymosin)elisa試劑盒 Human Thymosin Elisa Kit 96T/48T
人未磷酸化類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1elisa試劑盒 Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 Elisa Kit 96T/48T
人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)elisa試劑盒 Human parathyroid hormone-like protein, PLP Elisa Kit 96T/48T
人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)elisa試劑盒 Human visfatin Elisa Kit 96T/48T
人apelin 12(AP12)ELISA Ki Human apelin 12, AP12 Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)elisa試劑盒 Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide, GIP Elisa Kit 96T/48T
人胰島素原(PI)elisa試劑盒 Human Proinsulin, PI Elisa Kit 96T/48T
人胰島素受體β(ISR-β)elisa試劑盒 Human Insulin Receptor β, ISR-β Elisa Kit 96T/48T
人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)elisa試劑盒 Human Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa Kit 96T/48T
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒 Human ghcagons-like pepfide 1, GLP-1 Elisa Kit 96T/48T
人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)elisa試劑盒 human thyroid stimulating immunoglobulin, TSI Elisa Kit 96T/48T
人甲狀旁腺激素(PTH)elisa試劑盒 human Parathyroid hormone, PTH Elisa Kit 96T/48T
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)elisa試劑盒 human Prostaglandin D2-methoxime, PGD2-MOX Elisa Kit 96T/48T
人高敏甲狀腺素(u-T4)elisa試劑盒 human Ultrasensitivity Thyroxine, u-T4 Elisa Kit 96T/48T
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)elisa試劑盒 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone, U-TSH Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺(DA)elisa試劑盒 human dopamine, DA Elisa Kit 96T/48T
人(AZT)elisa試劑盒 human Azidothymidine, AZT Elisa Kit 96T/48T
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。