公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3[SKOV3] | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63932 |
細(xì)胞名稱(chēng) 卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3[SKOV3]
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。此細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性藥物包括白喉毒素、和均耐受。在裸鼠中致瘤,且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況: P(25+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 中國(guó)腺癌細(xì)胞系;CAFQ1形態(tài)特性: 上皮樣low-density lipoprotein-receptor-related protein 2
跨膜受體蛋白Notch-2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人胚胎腎細(xì)胞;HEK293-EDAR-His4形態(tài)特性: 上皮樣Notch-2
Ⅴ型膠原α2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;10A4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Collagen alpha-2(V) chain
LINGO1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 耐克唑替尼人胞肺癌細(xì)胞株;H3122-CR23形態(tài)特性: 上皮樣Leucine-rich repeat and immunoglobulin-like domain-containing nogo receptor-interacting protein 1
O-連鎖-N-乙酰葡糖胺基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 穩(wěn)定超表達(dá)miR-497的HPMC細(xì)胞株;HPMC形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣O-Linked-N-Acetylglucosamine Transferase
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3L檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 穩(wěn)定低表達(dá)miR-497的HPMC細(xì)胞株;HPMC形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣DNMT3L
口腔癌致病基因BPIFB2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;PYR/3D6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣BPI fold-containing family B member 2
醛脫氫酶3家族成員A1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;ZEN/6C2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Aldehyde Dehydrogenase 3 Family, Member A1
腎小管間質(zhì)腎炎抗原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;TMP/2G1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Tubulointerstitial Nephritis Antigen
Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;8B2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣BAG6
轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;PHb-3B4形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1
骨形成蛋白 24檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;2A2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Bone morphogenetic protein 24
蛋白基因產(chǎn)物9.5檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;CPU-LTMX1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣PGP9.5
G抗原7檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;XJ14-2F7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣GAGE7
GBU4-5檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): HEK293人胚腎細(xì)胞;ARKO-X88形態(tài)特性: 上皮樣GBU4-5
癌抗原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 內(nèi)膜干細(xì)胞;rhLIF-ERC(PUC57)形態(tài)特性: 上皮樣CAGE
逆轉(zhuǎn)錄病樣天冬氨蛋白酶1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 雜交瘤細(xì)胞株;XA297-2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Retroviral-like aspartic protease 1
卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3[SKOV3]D(+)-50-99-7中文別名:葡萄糖;右旋糖
英文名:D(+)-Glucose
CAS登錄號(hào):50-99-7
分子式:C6H12O6
分子量:180.16
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色結(jié)晶或顆粒狀粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來(lái)源:淀粉性水解制得。
溶解性:易溶于水,微溶于乙醇、,不溶于。
熔點(diǎn):146℃(無(wú)水α-D-葡萄糖),148~150℃(β-D-葡萄糖)
旋光度: 組成α:β=37:6,+112->52.7°(c=10,水)藥理藥效:
營(yíng)養(yǎng)物。用于血糖過(guò)低、心肌炎和補(bǔ)充體液等。高滲溶液用于腦水腫、肺水腫等。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。