公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1 | 貼壁生長 | EY-X63714 |
細(xì)胞名稱 發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Gelsevirine
CAS No.:38990-03-3
中文名:鉤吻綠
分子式:C21H24N2O3
蘆薈苷 訂購|咨詢 眼皮膚白?、虻鞍?OCA2) 規(guī)格: 20mg
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SPNS1 SPNS1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium ferulic
beta Bax/BCL2 associated X protein BCL2相關(guān)X蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cefditoren pivoxil
Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cefditoren pivoxil
CARD10 BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Pyrazinamide
CARD12 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Pyrazinamide
CARD14 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Demeclocycline hydrochloride
CARD15 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Demeclocycline hydrochloride
CARD4 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml NMethyl Paroxetine
鋅片 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Zinc 含量:BR,95%
新生 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:NovobiocinSodiumSalt 含量:BR,95%
新銅試劑 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cuprizon 含量:AR,99%
猩紅S 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PonceauS 含量:CP,500%
胸苷二 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:TMP 含量:植物細(xì)胞培養(yǎng)級,99%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Thymine 含量:USP級,98%
百里香酚藍(lán) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Bromothymolbluesodiumsalt 含量:高純,98%
代十二基*銨 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:DTAB 含量:IND
酚蘭 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:BPB 含量:CP,98%
酚蘭 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Bromophenolbluesodiumsalt 含量:CP,98%
發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養(yǎng)基規(guī)格:1000ml用途:用于快速、準(zhǔn)確同時(shí)檢測大腸桿菌和大腸菌群,培養(yǎng)24小時(shí),大腸桿菌顯藍(lán)色熒光,大腸菌群顯藍(lán)色
萋 - 尼氏染色液規(guī)格:5ml/支*6用途:用于細(xì)菌抗染色
煌綠瓊脂(BGA)規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)
乙基紫疊氮鈉肉湯規(guī)格:250g用途:用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)
布氏肉湯規(guī)格:或加瓊脂配制布氏瓊脂詳情介紹
艾格瓊脂規(guī)格:250g用途:用于過程中無菌監(jiān)測
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。