實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
纖維肉瘤細(xì)胞系；JH-2 | 貼壁生長 | EY-X63698 |
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細(xì)胞名稱 纖維肉瘤細(xì)胞系；JH-2
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況: C10
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Clausine Z
CAS No.：866111-14-0
中文名：
分子式：C13H9NO3
當(dāng)歸 訂購|咨詢 胸腎表達(dá)趨因子(BRAK) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
BMS188797 訂購|咨詢 胸腎表達(dá)趨因子(BRAK) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
β隱黃質(zhì) 訂購|咨詢 胸腎表達(dá)趨因子(BRAK) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
氧 訂購|咨詢 胸腺生成素(TMPO) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
3基11基乳香 訂購|咨詢 胸腺因子(TF) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
匙羹藤I 訂購|咨詢 胸腺表達(dá)趨因子(TECK) 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
麝香草 訂購|咨詢 β10(TMSβ10) 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg
素 訂購|咨詢 β4(Tβ4) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
牛磺 訂購|咨詢 胸腺旁腺素(PTMS) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
蘿卜素 訂購|咨詢 胸腺旁腺素(PTMS) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
酒石伐侖克林 訂購|咨詢 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
高車前苷 訂購|咨詢 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
大黃素8OβD葡萄糖苷 訂購|咨詢 胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
白屈菜 訂購|咨詢 胸腺嘧啶核苷酶(TP) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
澤瀉B 訂購|咨詢 胸腺嘧啶核苷酶(TP) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
紫萁 訂購|咨詢 胸腺激活調(diào)節(jié)趨因子(TARC) 規(guī)格： HPLC≥95%;20mg
偽原 訂購|咨詢 胸腺激活調(diào)節(jié)趨因子(TARC) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
羅漢果苷IV 訂購|咨詢 胸腺激活調(diào)節(jié)趨因子(TARC) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
MICB MHC I類鏈相關(guān)蛋白B 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Enoxaparin sodium
TAPA1/CD81 CD81抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Trimebutine maleate
HAND2 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Heparin sodium
MYF5 生肌決定因子Myf5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml HEβCD
SCC112/PIG54 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Nefopam HCl
EBNA1/EBV Nuclear Antigen EB病核抗原1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Methotrexate disodium
βsynuclein/SNCB 核突觸蛋白β抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Methotrexate disodium
KDEL (ER Marker) 賴，天冬，谷，亮相關(guān)序列抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sarafloxacin HCl
碳鋰 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:LithiumCarbonate 含量:AR，10000目，99%
碳 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumcarbonateanhydrous 含量:AR，99%
碳鎳 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Nickel(II)carbonatebasictetrahydrate 含量:AR，99%
碳銫 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cesiumcarbonate 含量:BR，97%
碳鈰(Ⅲ) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ceriumcarbonatehydrate 含量:5N
碳脫水酶(牛紅血球) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Carbonicanhydrase(Bovineerythrocytes) 含量:BR，98%
碳鋅氫物 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Zinccarbonatebasic 含量:AR，40%
碳亞脲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Guanidinecarbonate 含量:CP，99%
碳亞錳 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Manganouscarbonate 含量:色固
碳緩沖液 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:CarbonateBuffersolution 含量:蛋白生物學(xué)
纖維肉瘤細(xì)胞系；JH-2胰胨-亞硫鹽-環(huán)絲氨瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格：250g用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
1%TTC溶液規(guī)格：5支/盒用途：每支添加于100mlHB0268中
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒規(guī)格：5ml*2用途：用于吲哚（靛基質(zhì)）試驗(yàn)
遠(yuǎn)藤氏瓊脂規(guī)格：250g用途：用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。
美藍(lán)（亞甲基藍(lán)）規(guī)格：25g用途：炭疽桿菌檢測用配套試劑
李氏菌增菌肉湯（LB2）規(guī)格：9ml*20支/包用途：用于李氏菌二步增菌
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